Mit Hilfe eines Holmiumoxidglasfilters wird die Wellenlängengenauigkeit validiert. Der Filter kann zur Wellenlängenvalidierung in den Lichtweg vor den Eingangsschlitz gefahren werden. Der Detektor bestimmt die Wellenlängen von verschiedenen Absorptions-Peaks im resultierenden Spektrum und vergleicht sie mit den nominalen Holmiumoxid-Werten, die in der Detektorfirmware hinterlegt sind.
Eine Validierung kann für alle Lampenkonfigurationen durchgeführt werden (beide Lampen eingeschaltet, nur UV-Lampe eingeschaltet und, jedoch nicht empfehlenswert: nur VIS-Lampe eingeschaltet (wenn vorhanden)).
Die Genauigkeit wird für Wellenlängen verifiziert, die in der Konformitätserklärung für den Holmiumoxidglasfilter genannt sind. Informationen zur Erklärung finden Sie in NIST-Konformität.
Eine Wellenlängenvalidierung kann auch mit einem externen Standard durchgeführt werden, beispielsweise mit einer Koffeinlösung. Bei diesem Verfahren kann eine Genauigkeit von ± 1 nm erreicht werden.
Wann
In folgenden Fällen wird eine Wellenlängenvalidierung empfohlen:
Nachdem der Detektor bewegt wurde
Nach einem Austausch der Messzelle
Nach einem Lampentausch
Vorbereitungen
Bevor Sie mit der Wellenlängenvalidierung oder Wellenlängenkalibrierung beginnen, beachten Sie folgende Hinweise:
Lassen Sie die Messzelle für 5 Minuten aufwärmen.
Stellen Sie sicher, dass die Basislinie ausreichend stabil ist. Die Basislinie kann beispielsweise aufgrund einer Änderung der Lösungsmittel-Zusammensetzung oder aufgrund von Luftblasen im Lichtweg instabil sein.
Achten Sie darauf, dass das Lösungsmittel, das durch die Messzelle fließt, im Wellenlängenbereich, in dem die Verifizierung mit dem Holmiumoxidglasfilter stattfindet, keine Absorption zeigt.
Dieses Problem tritt beispielsweise dann auf, wenn die Messzelle mit 96% Hexan und 4% Ethylacetat gefüllt ist. Es wird empfohlen, entgastes Wasser in LC/MS-Qualität zu verwenden.
Warten Sie, bis die Lampen aufgewärmt sind und die Betriebstemperatur erreicht haben. Die Lampen sollten mindestens eine Stunde lang eingeschaltet sein, bevor Sie mit der Wellenlängenvalidierung oder Wellenlängenkalibrierung beginnen. Ein Lampenspektrum verändert sich stark innerhalb der ersten Minuten nach dem Einschalten der Lampe.
So führen Sie eine Wellenlängenvalidierung durch
Schalten Sie den Pumpenfluss ein und stellen Sie die gleiche Flussrate wie für die Analyse ein.
Führen Sie im Commands-Fenster des Chromatographie-Datensystems den Befehl WavelengthValidation aus.
Wenn die Wellenlängenvalidierung fehlschlägt, führen Sie eine Wellenlängenkalibrierung durch.
So führen Sie eine Wellenlängenkalibrierung durch
Führen Sie im Commands-Fenster des Chromatographie-Datensystems den Befehl WavelengthCalibration aus.