Sie können die Wellenlängenkalibrierung mit Wasser (Raman-Messung) überprüfen. Schlägt die Validierung fehl, d.h. wurden deutliche Abweichungen in den Kalibrierwerten festgestellt, können Sie eine Wellenlängenkalibrierung mit Wasser (Raman-Messung) durchführen. Das Lichtspektrum der Xenon-Blitzlampe wird zur Kalibrie­rung der Anregungswellenlänge verwendet.

Wann

  • Im Anschluss an die (Re)Installation des Detektors

  • Im Anschluss an die Wellenlängenkalibrierung

Vorbereitungen

Sowohl für die Wellenlängenvalidierung als auch für die Raman-Wellenlängenkalibrierung müssen folgende Bedingungen erfüllt sein:

  • Das System ist äquilibriert und die Umgebungsbedingungen sind stabil.

  • Es befinden sich keine Luftblasen in der Messzelle. Es wird empfohlen, das Wasser zu entgasen. Stellen Sie eine Flussrate von 0,5 mL/min ein und warten Sie ca. 15 Minuten, bevor Sie beginnen, bis die Basislinie ausreichend stabil ist.

  • Das Wasser weist keine Verunreinigungen auf. Verwenden Sie nur Wasser in Fluoreszenz-Qualität und verwenden Sie ggf. einen Filter oder eine geeignete Säule vor dem Detektor.

So führen Sie eine Wellenlängenvalidierung durch

Sie können die Wellenlängenvalidierung über Chromeleon durchführen. Die Wellenlängenvalidierung kann einige Minuten in Anspruch nehmen. In dieser Zeit kann keine Datenaufnahme erfolgen.

  1. Führen Sie den Befehl ValidateRaman aus, um die Validierung zu starten.

    Folgende Meldung erscheint in Chromeleon:

    Make sure that

    • the system is equilibrated and conditions are stable

    • fluorescence-grade water is flowing through the cell

    • the water is degassed (no air bubbles) and free of particles

  2. Bestätigen Sie die Meldung mit OK, wenn Sie sicher sind, dass die oben genannten Bedingungen erfüllt sind.

    Die Wellenlängenvalidierung kann bis zu fünf Minuten in Anspruch nehmen. Im Chromeleon Audit Trail wird das Ergebnis ("passed"/"failed") angezeigt.

    • Passed: Die Wellenlängengenauigkeit ist innerhalb der Spezifikation. Die genaue gemessene Wellenlänge können Sie unter RamanValidationWL ablesen. Der Idealwert der Messung liegt bei 397 nm.

    • Failed: Die Kalibrierung des Detektors ist nicht ausreichend. Führen Sie eine Wellenlängenkalibrierung durch. Wenn die Wellenlängenvalidierung auch nach einer erneuten Kalibrierung fehlschlägt, prüfen Sie die unten aufgeführten Ursachen und Abhilfemaßnahmen.

Mögliche Ursache

Abhilfe

Messzelle falsch eingebaut

Prüfen Sie, ob die Messzelle korrekt sitzt und ob die Schrauben fingerfest angezogen sind.

Im System herrschen nicht die erforderlichen Bedingungen.

Beachten Sie die Bedingungen für die Wellenlängenvalidierung und -kalibrierung. Wird der Vorgang wiederholt abgebrochen, wenden Sie sich an den Kundendienst.

Messzelle kontaminiert

Reinigen Sie die Messzelle.